1、考馬斯亮藍試劑:考馬斯亮藍G—250100mg溶于50ml95%乙醇,加入100ml85%H3PO4,雍蒸餾水稀釋至1000ml,濾紙過濾。最終試劑中含0.01%(W/V)考馬斯亮藍G—250,4.7%(W/V)乙醇,8.5%(W/V)H3PO4。2、...
0.2%考馬斯亮藍R250:0.2g考馬斯亮藍R250粉加入甲醇46.5ml、冰醋酸7ml、蒸餾水46.5ml。3%戊二醛:6ml25%戊二醛加入B液44ml。2.4方法將材料置于裝有PH6.8磷酸緩沖液的燒杯中,使其下沉。吸去磷酸緩沖液,用1%TritonX-100處理30分鐘...
試管編號0123456標準蛋白溶液(mL)00.010.020.030.040.050.060.10.090.080.070.060.050.04考馬斯亮藍試劑(mL)5mL搖勻,1h內以0號管為空白對照,在595nm處比色A59...
考馬斯亮藍法測定蛋白質濃度,是利用蛋白質染料結合的原理,定量的測定微量蛋白濃度的快速、靈敏的方法??捡R斯亮藍(CoomassieBrilliantBlue)法測定蛋白質濃度,是利用蛋白質―染料結合的原理,定量的測定微量蛋白濃度的快速、靈...
考馬斯亮藍法測定蛋白質含量流程:該方法用于大多數蛋白質的定量是比較精確的,但不適用于小分子堿性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污劑的濃度超過0.2%影響測定結果。如TritonX-100、SDS、NP-40等。1.Bradford濃染...
體系不一致??捡R斯亮藍法的結果偏大是因為加樣體系不一致,混勻不一致,有氣泡等??捡R斯亮藍法于1976年建立起來的一種蛋白質濃度的測定方法。
bradford法測定蛋白質含量,也就是考馬斯亮藍法,其原理是考馬斯亮藍在游離狀態下呈棕紅色,最大光吸收在488nm;當它與蛋白質結合后變為藍色,蛋白質—色素結合物在595nm波長下有最大光吸收。其光吸收值與蛋白質含量成...
1.血漿樣本放置時間太久,蛋白質變性;2.實驗比色杯由于使用后未及時擦洗,導致比色誤差(原因小);3.人為操作不當,導致誤差
bradford法測定蛋白質含量的原理是考馬斯亮藍G250與蛋白質結合可以顯色,用分光光度計在吸光度595nm處讀數,通過標準蛋白與G250結合顯色建立標準曲線,再加待測蛋白與G250結合顯色后讀數代入標準曲線測定蛋白質含量。不利...
(一)方法:考馬斯亮藍比色法;福林酚比色法(二)目的要求:掌握測定蛋白質含量的原理和方法,了解蛋白含量測定的意義及使用方面。練習分光光度計的使用和標準曲線的制作。(三)重點:了解實驗原理,正確運用方法。(四)難點:樣品提取及適度...